Isabella von Kastilien (22. April 1451 - 26. November 1504) war eine Königin von Kastilien und León. Sie war die Tochter von Johannes II. von Kastilien und seiner zweiten Gemahlin Isabel von Portugal.
Ihr Bruder, Enrique IV., der König von Kastilien, wollte sie verheiraten. Sie wollte jemanden aus Portugal heiraten, um einen politischen Verbündeten zu finden. Im Jahre 1469 heiratete sie heimlich Ferdinand II. von Aragon und bekam fünf Kinder mit ihm. Das jüngste war Katharina von Aragón, die 1509 Heinrich VIII. von England heiratete. Isabella war die Großmutter von Karl I. von Spanien (Karl V., Kaiser des Heiligen Römischen Reiches).
Als Isabellas Bruder starb, sollte sie die neue Königin werden. Die Tochter ihres Bruders Enriques, Juana, wollte stattdessen Königin werden. Nach einem Krieg wurde Isabella Königin. Zur gleichen Zeit wurde Isabellas Ehemann Ferdinand König von Aragon. Sie vereinigten die Länder Kastilien und Aragonien im heutigen Spanien. Isabella half, vier Reisen von Christoph Kolumbus nach Amerika zu bezahlen. Zu ihrer Zeit wurden die Amerikas "die neue Welt" genannt. Im Jahr 1492 unterzeichnete sie einen Waffenstillstand, der Spanien zu einem christlichen Land machte. Nach ihrem Tod wurde ihre Tochter Johanna von Kastilien Königin.
