DNA-Konstrukt
Ein DNA-Konstrukt ist ein künstlich hergestelltes Nukleinsäuresegment, das in ein Zielgewebe oder eine Zielzelle "transplantiert" wird.
Es enthält oft eine DNA-Insertion, die die Gensequenz enthält, die für ein Protein von Interesse kodiert. Die DNA-Insertion ist in einen molekularbiologischen Vektor subkloniert worden.
Ein DNA-Konstrukt kann Wildtyp-Protein exprimieren oder die Expression bestimmter Gene durch Expression von Konkurrenten oder Inhibitoren verhindern. Es kann mutierte Proteine exprimieren, wie z.B. Deletionsmutationen oder Missense-Mutationen. Ein DNA-Konstrukt wird in der Molekularbiologie häufig zur genaueren Analyse von Makromolekülen wie Proteinen oder RNA verwendet.
Molekularbiologische Vektoren
Ein molekularbiologischer Vektor ist ein DNA-Molekül, das als Vehikel verwendet wird, um fremdes genetisches Material in eine andere Zelle zu übertragen.
Die wichtigsten Arten von Vektoren sind Plasmide, Bakteriophagen und andere Viren sowie künstliche Chromosomen. Allen künstlichen Vektoren gemeinsam sind ein Replikationsursprung, eine Multiklonierungsstelle und ein wählbarer Marker.
Der Vektor selbst ist im Allgemeinen eine DNA-Sequenz, die aus einem Insert (Transgen) und einer größeren Sequenz besteht, die als "Rückgrat" des Vektors dient. Das "Rückgrat" umfasst bakterielle Resistenzgene für das Wachstum in Bakterien und Promotoren für die Expression im Organismus.
Der Zweck eines Vektors, der genetische Information auf eine andere Zelle überträgt, besteht normalerweise darin, das Insert in der Zielzelle zu isolieren, zu vermehren oder zu exprimieren.
Das Einbringen eines Vektors in die Zielzelle wird bei Bakterienzellen üblicherweise als Transformation, bei eukaryotischen Zellen als Transfektion bezeichnet. Die Insertion eines viralen Vektors wird oft als Transduktion bezeichnet.
Es gibt zwei Arten der Plasmidintegration in ein Wirtsbakterium: Nicht-integrierende Plasmide replizieren sich wie bei der oberen Instanz, während Episomen, das untere Beispiel, sich in das Wirtschromosom integrieren.
Fragen und Antworten
Q: What is a DNA construct?
A: A DNA construct is a segment of nucleic acid that is artificially constructed to be transplanted into a target tissue or cell.
Q: What does a DNA construct often contain?
A: A DNA construct often contains a DNA insert, which includes the gene sequence for a protein of interest.
Q: What is a molecular biology vector?
A: A molecular biology vector is a vehicle used to transfer DNA fragments from one cell to another.
Q: How might a DNA construct prevent the expression of certain genes?
A: A DNA construct may express competitors or inhibitors that prevent the expression of certain genes.
Q: What types of mutant proteins might a DNA construct express?
A: A DNA construct may express mutant proteins, such as deletion mutations or missense mutations.
Q: What is the purpose of using a DNA construct in molecular biology?
A: The purpose of using a DNA construct in molecular biology is to analyze macromolecules such as proteins or RNA in more detail.
Q: What types of proteins may a DNA construct express?
A: A DNA construct may express wildtype protein, mutant proteins, or competitors/inhibitors.
